消毒器械脊髓灰质炎病毒服务 欢迎咨询
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产品描述

检测项目病毒灭活 服务内容病毒灭活实验 行业类型实验 所在地广州 安全质量检测类型可靠性检测
可以通过物理方法或者是化学的方法,使病毒灭活以及失去活力,大多数病毒耐冷不耐热,所以可以通过加热的办法使病毒失去活力。另外,大多数病毒在PH值5-9之间可以存活,所以可以用碱性制剂,或者是酸性制剂浸泡消毒物品,也可以使绝大部分病毒灭活。此外紫外线、X射线等也可以使病毒灭活,这种射线引起病毒灭活的机制是使病毒的核苷酸合成受到抑制。化学制品比如等,也可以对病毒有灭活作用。除此之外,消毒剂比如、等,也有对病毒的灭活能力。一些中草药比如板蓝根、大青、叶大黄等,对某些病毒也有一定的抑制作用。
病毒灭活试验适用范围:主要适用于消毒产品或日常监测。用具有一定代表性的、活的病毒及其细胞感染技术,评价各种用途的消毒因子对测试病毒的杀灭效果。按此方法进行的试验,只是对消毒因子的灭活病毒能力的重要方面进行验证。
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病毒灭活滴度计算方法:终点稀释法病毒感染滴度的计算以半数细胞感染剂量(TCID5o) 表示。TCID5o 的对数值计算公式如下。
TCID5o对数值=病变率**50%组稀释度的对数值+距离比例(“病变率**50%组”是指病变率**过50%的组,下简称“**50% 组”;“病变率低于50%组”是指病变率低于50%的组,下简称“低于50%组”)。
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病毒灭活的机理有三:
1、破坏包膜:包膜含有脂类物质,因之有包膜的病毒可迅速被脂溶剂破坏,如、氯仿或去氧胆酸钠可使病毒灭活。实际上可利用病毒对脂溶剂的敏感性来检查病毒是否有包膜。物理因子,如渗透压改变、冻融、热和干燥等都可引起包膜破坏。一般认为,呼吸道感染的病毒对于燥抵抗力弱,传播主要是人间直接感染,这是因为有包膜的原故。
2、病毒蛋白质变性:能使蛋白质变性的化学制剂都能使病毒灭活,如酚、、次氯化物、酸和碱等。加热引起变性也是有效灭活的方法。一般说病毒对热抵抗力弱,60°C几分钟就使之感染性明显降低,因此在分离病毒时,从患者取来的标本需低温保存,迅速送往实验室,长期保存置于-80°C以下的低温条件。
3、病毒核酸的损害:、y线等电离辐射可切断核酸,紫外线可使核苷酸链上相邻的嘧啶碱基形成二聚物,而破坏病毒基因的功能。另外吖啶橙或中性红等染料可与病毒核酸结合,暴露于光线之下,可使核酸分解,而使病莓灭活。
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病毒灭活试验病毒悬液的制备:
1、从液氮中取出冻存的试验用宿主细胞,在37°C温水中迅速融化,用毛细吸管移植于含有细胞维持液的细胞管内,吹吸数次,使混匀,立即离心(3000r/min, 3min) ,去上清液。再加入适当的细胞维持液,吹吸数次,使混匀,同上离心后,转种于加有10完全培养基的培养瓶中。逐日观察细胞生长情况,在细胞长满单层时,用于消毒试验。
2、取出低温冻存的试验病毒毒种,37°C水浴融化,用细胞维持液作10倍稀释,然后接种于已经长满单层细胞的细胞瓶内,置37°C温箱中,使与细胞吸附、生长。逐日观察病变,待3/4细胞出现病变时,收获病毒。
3、将含有病毒及宿主细胞的培养液,在冰浴条件下,用超声波(或反复冻融)破碎宿主细胞,释放病毒。然后,尽快离心(6000r/min,15min)去除沉淀(主要为细胞碎片),上清液即为所需的病毒悬液。按每管1. 0分装于无菌离心管(1.5)中。
4、取1支病毒悬液,按病毒滴度测定法,测定其病毒滴度。其余均冷冻保存于-80°C备用。
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