病毒dna定量检测正常值 经验丰富

病毒是无细胞结构的小，简单的微生物。但病毒的感染很普遍,在微生物引起的感染性疾病中大多数由病毒引起。病毒感染在感染性疾病中占有重要地位，尽快获得病毒的实验诊断，对控制病毒的传播，疾病的诊断和防治有较其重要意义，而且通过实验诊断还可以发现新病毒。目前的病毒检测技术主要有传统的病毒分离培养，中和实验，凝集试验，电镜技术等；*学的*荧光检测，酶*法，*层析法，放射*法等；分子生物学的聚合酶链反应，基于核酸序列的扩增技术，环介导等温扩增技术，Xtag RVP技术，生物芯片技术等。
空斑形成试验：是一种检查和准确测定病毒滴度的方法。
1、将稀释的病毒悬液加入单层细胞培养瓶中。病毒吸附后,再覆盖-层融化的半固体营养琼脂,使病毒在单层细胞培养中有限扩散。
2、结果是每一个有感染性的病毒在单层细胞中可产生一个局限性的感染灶。用活性染料(如中性红)染色,则活细胞着色,受病毒感染而破坏的细胞不着色,形成肉眼可见的空斑/蚀斑(plaque)。
3、每个蚀斑是由一个感染毒颗粒形成的 ,称作空斑形成单位(plaque forming unit, PFU)。
4、病毒悬液中的感染毒量的滴度可用PFU / 表示。

消毒与检测方案
1.消毒依据
《公共场所感染的卫生防护指南》（机制发〔2020〕15号）
广东省疾病预防控制中心“关于印发普通家庭、公共交通服务单位及公共交通工具、农贸市场预防感染的卫生清洁消毒指引的通知”
《广东省餐饮服务业感染的预防控制指引》
四川省公共场所室内环境“感染的”预防指南等
2.消毒服务类型
（1）预防性消毒：定期对的处理区域进行一次消毒，使用容量喷雾机对环境及物体表面进行喷雾消毒。
（2）应急性消毒：在区域内发现源或生物污染物时，需及时对相关区域进行应急消毒。使用容量喷雾，对环境、空气及物体表面进行喷雾（洒）消毒。对重点部位的物体表面进行擦拭消毒。
3.消毒作业方法：详见广州市微生物研究所消毒作业方法
4.检测方案
参照《GB/T 18883-2002室内空气质量标准 附录D 室内空气中菌落总数的检验方法》对室内空气中的菌落总数进行测试，以确保消毒效果。

病毒核酸分子检测：
1、基因芯片：基因芯片(gene chip)又称基因微矩阵(DNAmicroarry)具有微型化、高通量、并行处理易于自动化等优越性,它将大量的靶基因片段有序、高密度地排列在玻片、硅等载体上，用荧光检测后，通过计算机软件进行数据比较和分析,一次试验就可对上万种基因进行快速准确、的检测。
2、实时荧光定量PCR： 目前有效、灵敏的方法就是实时荧光定量PCR ( real time RT-PCR ) ,根据目标核酸基因来设计引物实现对靶标的检测，已广泛应用在样品的检测。real time RT-PCR是将荧光能量传递技术应用于PCR仪中，在PCR的反应体系中加入荧光基团,利用获取的荧光信号积累来实时监测整个PCR进程,终通过得到的标准曲线对未知得模板进行定量分析的方法。

病毒的分离与培养：主要有细胞培养法、鸡胚培养法、动物接种法等,而对细胞、鸡胚不敏感，又没有合适动物模型的病毒，可采用基因克隆的方法。
1、细胞培养法：二倍体细胞株来源于正常人胎儿组织,主要用于培养病毒制备疫苗等;原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞,原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和后立即进行培养;传代细胞来源于细胞或细胞株传代过程中变异的细胞。
2、鸡胚培养：鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的动物病毒的一种培养方法,此方法可用以进行多种病毒的分离、培养,勒的滴定,中和试验以及抗原和疫苗的制备等。
3、动物接种：常用的实验动物有、乳鼠、、家兔猴和鸡等;常用的接种途径包括皮下、皮内、腹腔、静脉、角膜、鼻腔及脑内接种等方式。
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