病毒学检验技术是用实验室检验方法对和流行病学现场送检的标本( 如人或宿主的血液、组织、尿、粪便和组织液等)进行病毒学的定性和定量分析,为病毒感染和病毒性疾病的诊断、和预防提供科学依据。
病毒检测形态学检查及诊断:
1、光学显微镜:直接观察到较大的病毒体(如痘病毒)、包涵体狂犬病毒感染一一嗜酸性包涵体。
2、扫描电子显微镜:用于观察病毒和表面结构和附属结构等。
3、透射电子显微镜:用于观察病毒的大小、形态与结构及细胞内的**微结构等。
消毒与检测方案
1.消毒依据
《公共场所感染的卫生防护指南》(机制发〔2020〕15号)
广东省疾病预防控制中心“关于印发普通家庭、公共交通服务单位及公共交通工具、农贸市场预防感染的卫生清洁消毒指引的通知”
《广东省餐饮服务业感染的预防控制指引》
四川省公共场所室内环境“感染的”预防指南等
2.消毒服务类型
(1)预防性消毒:定期对的处理区域进行一次消毒,使用容量喷雾机对环境及物体表面进行喷雾消毒。
(2)应急性消毒:在区域内发现源或生物污染物时,需及时对相关区域进行应急消毒。使用容量喷雾,对环境、空气及物体表面进行喷雾(洒)消毒。对重点部位的物体表面进行擦拭消毒。
3.消毒作业方法:详见广州市微生物研究所消毒作业方法
4.检测方案
参照《GB/T 18883-2002室内空气质量标准 附录D 室内空气中菌落总数的检验方法》对室内空气中的菌落总数进行测试,以确保消毒效果。
病毒核酸分子检测:
1、基因芯片:基因芯片(gene chip)又称基因微矩阵(DNAmicroarry)具有微型化、高通量、并行处理易于自动化等优越性,它将大量的靶基因片段有序、高密度地排列在玻片、硅等载体上,用荧光检测后,通过计算机软件进行数据比较和分析,一次试验就可对上万种基因进行快速准确、的检测。
2、实时荧光定量PCR: 目前有效、灵敏的方法就是实时荧光定量PCR ( real time RT-PCR ) ,根据目标核酸基因来设计引物实现对靶标的检测,已广泛应用在样品的检测。real time RT-PCR是将荧光能量传递技术应用于PCR仪中,在PCR的反应体系中加入荧光基团,利用获取的荧光信号积累来实时监测整个PCR进程,终通过得到的标准曲线对未知得模板进行定量分析的方法。
病毒增殖的观察:
病毒在细胞内增殖的指标:
1、细胞形态的改变;
2、红细胞吸附;
3、细胞培养液pH值改变;
病毒数量趿病毒感染性测定:
1、血凝试验;
2、中和试验;
3、空斑形成试验;
4、半数感染量(ID50)和组织培养半数感染量( TCID50 )。
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